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前列腺特异抗原启动子文献资料
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PSA启动子调控并荷载hTERT－siRNAs的条件增殖型腺病毒的构建及生物学活性
目的：构建前列腺特异抗原（ PSA）启动子调控并荷载hTERT－siRNAs的条件增殖型腺病毒，研究其对前列腺癌的特异性抗肿瘤作用。方法 EcoRⅤ和XbaⅠ分别酶切pZD55－hTERT－shRNA和pZXC2－PSA－E1A，将目的片段连接重组，获得质粒pPSA －ZD55－hTERT，将其与质粒pBHGE3共转染293细胞。 PCR鉴定正确者即为条件增殖型腺病毒PSA －ZD55－hTERT。结晶紫染色观察其对前列腺癌细胞毒性。 RT－PCR、Western blot检测前列腺癌细胞中hTERT基因沉默效果。 Western blot检测E1A在前列腺癌细胞中的表达。结果成功构建PSA启动子调控并荷载hTERT－siRNAs的条件增殖型腺病毒PSA－ZD55－hTERT，初步证实PSA－ZD55－hTERT复制具有前列腺癌靶向性和特异的hTERT沉默效果。结论成功构建条件增殖型腺病毒PSA－ZD55－hTERT，为进一步体内外研究其对前列腺癌的治疗作用奠定基础。
关键词： 前列腺癌 前列腺特异抗原启动子 hTERT基因 RNA干扰 腺病毒
