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转录重组体文献资料
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2a/Ⅲ型丙型肝炎病毒基因组非结构4区全长序列的扩增、克隆及分析
目的获得2a/Ⅲ型丙型肝炎病毒(HCV)基因组全长非结构(NS)4区克隆并作序列分析.方法用限制性片段长度多态性分析(RFLP)基因分型方法筛选出2a/Ⅲ型HCV一株.为了获得该毒株全长NS4区基因序列,依据代表株序列的NS3区之3′末端及NS5区之5′末端相对保守区域合成引物,以RT-nested-PCR方法扩增一段1.3kb的片段cDNA;将此片段插入pUC19质粒载体.结果克隆了丙型肝炎基因组非结构NS4区全长基因,构建了pUC-NS4重组体,对重组体进行酶切鉴定,克隆的cDNA与预计的片段大小相符,并作序列测定.结论获得全长NS4区基因克隆,经序列分析表明,与日本HC-J6有较高的同源性(92.1%).
关键词： 限制性片段长度多态性分析 聚合酶链反应 克隆 测序 转录重组体
