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E.coli pKU/JM109文献资料
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尿酸酶产生菌的筛选、基因克隆及表达
目的:构建表达尿酸酶的重组基因工程菌,提高尿酸酶的表达量.方法:从12株酵母菌中筛选得到1株产尿酸酶的产朊假丝酵母Cu2357菌株,应用DNA重组技术,将野生菌尿酸酶基因克隆到表达载体pKA中,获得重组尿酸酶基因工程菌 E.coli pKU/JM109.结果:构建的表达载体中的目的基因序列正确.经SDS-PAGE检测表明,表达的蛋白质相对分子质量约为34 kDa,含量占细胞可溶性蛋白的49%. 优化培养条件后,发酵液尿酸酶活力可达16 U/mL,是野生菌产尿酸酶量的240多倍.结论:尿酸酶基因在E.coli pKU/JM109中实现了高效表达.
关键词： 尿酸酶 E.coli pKU/JM109 克隆 表达
