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谷氨酰胺对饥饿小鼠小肠乳脂肪球上皮生长因子E8表达的影响
目的:观察谷氨酰胺对饥饿小鼠小肠乳脂肪球上皮生长因子E8(MFG-E8)表达的影响。方法将25只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC组,n=5),全饥饿组(S组,n=5)和谷氨酰胺灌胃组(G组,n=15)。其中谷氨酰胺灌胃组根据不同的灌胃量[1g/(kg?d)、3g/(kg?d)、5g/(kg?d)]分为3个亚组G1组(n=5)、G3组(n=5)、G5组(n=5)。NC组正常饮食,饮水。S组和G组仅正常饮水。G组给予不同剂量谷氨酰胺水溶液灌胃,1次/d,0.5ml/次,共3次。NC组和S组给予生理盐水灌胃0.5ml/d。72h后脱颈法处死小鼠,取小肠组织。HE染色观察小肠绒毛发育;TUNEL法检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测小肠组织MFG-E8mRNA及MFG-E8蛋白表达。结果饥饿72h后小肠绒毛呈现萎缩状态,绒毛高度、隐窝深度及绒毛面积均明显降低;黏膜上皮细胞凋亡增加;MFG-E8在基因水平和蛋白水平表达均增加。谷氨酰胺灌胃后小肠绒毛萎缩状态改善,黏膜上皮细胞凋亡减少,MFG-E8mRNA和蛋白均较单纯饥饿组降低,且mRNA降低与谷氨酰胺灌胃量呈剂量依赖。结论 MFG-E8可作为饥饿后反映小肠代偿功能的标志,MFG-E8升高可能是小肠饥饿损伤后的一种自我保护性反应。
关键词: 谷氨酰胺 饥饿 小肠绒毛发育 凋亡 乳脂肪球上皮生长因子E8