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MK-EGFP融合蛋白的构建和表达
目的 克隆中期因子(mid kine,MK)的编码序列,构建MK-EGFP融合表达质粒,诱导表达并亲合纯化.方法 用RT-PCR技术从人胚胎组织中获得MK编码基因,构建原核表达质粒pET-MK-EGFP;转化大肠杆菌,诱导表达重组蛋白;纯化回收后鉴定生物活性.结果重组质粒经酶切测序与预期相符,融合蛋白表达后的指示荧光于激光共聚焦显微镜下清晰可见,MK在其中保持了原有的完整构象和生物活性.结论 MK-EGFP重组质粒构建正确,融合蛋白大量表达,并具有完整的生物学活性.
关键词: 中期因子(MK) 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) -
中期因子与细胞凋亡、炎症和肿瘤
中期因子(midkine,MK)是一种分泌型肝素结合生长因子,为低分子量的蛋白质.MK大量表达于妊娠中期并在妊娠的发展中起着重要的作用.在成人,MK被限制在一定的组织中表达.然而,在肿瘤发生,炎症和组织细胞修复的过程中,MK的表达明显增强.
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中期因子在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义
目的 探讨中期因子(midkine,MK)在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测28例喉鳞癌组织 MK表达水平,并对其与喉鳞癌临床病理特征的关系进行统计学分析.结果 MK在喉鳞癌组织中有表达,其中喉鳞癌细胞的细胞质及细胞膜均见表达,28例标本中MK阳性表达者12例,阳性表达率为42.86%,强阳性表达者7例.MK阳性表达与喉鳞癌组织分化程度有关,高分化组比中低分化组的喉鳞癌组织中MK阳性率低,差异有统计学意义(P<0.05),MK的阳性率与性别、年龄、TNM分期、淋巴结转移均无明显相关(P>0.05).结论 MK在喉鳞状细胞癌组织中有表达,表达水平与其组织分化程度有关.