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  • 用磁捕法快速分离HCV-mRNA

    作者:刘永章;胡操寒;金龙金

    [摘要]目的:寻找一种操作简便、快速、敏感性高、重复性好且特异性强的RNA分离纯化方法。方法:磁捕法是用亲和素包被的磁珠交联带有生物素标记的丙型肝炎病毒( HCV)寡核苷酸探针,与血清HCV-mRNA(以异硫氰酸胍作裂解液)特异性结合,经洗涤分离纯化HCV-mRNA模板,作逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),用于检测HCV患者血清。并用蛋白酶K消化法作对照。结果:磁捕法检测抗-HCV阳性肝病患者血清50例,HCV-RNA阳性34例(68%),对34 例阳性标本,用蛋白酶K消化法提取HCV-mRNA检测HCV,结果HCV RNA阳性仅28例。结论:磁捕法分离HCV-mRNA具有操作简便、快速、重复性好等优点。

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