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浙贝母中内生菌的多样性及组成分析
[目的]研究浙贝母器官内生菌群,以期探明浙贝母道地性的形成机制,为开发其潜在的内生菌资源提供理论依据.[方法]本实验用PCR-变性凝胶梯度电泳(DGGE)对浙贝母的根、鳞茎、地上茎以及叶中的内生菌多样性和组成进行了检测和分析.[结果] DGGE结果表明,浙贝母不同器官中的内生菌多样性和结构均有差异.根部条带明显比其它器官多,内生细菌多样性指数高(2.69),而且出现不少特异性条带;茎中的细菌多样性为2.44;叶中低,仅2.21.测序结果表明,浙贝母中的内生细菌主要为蓝细菌、根瘤菌、睾丸酮假单胞菌、伯克氏菌属和燕麦噬酸菌,后两种菌均为β-变形菌,该菌的存在可能会对浙贝母的生长产生不利影响,而根瘤菌和丛毛单胞菌则对其生长有利.根部特异性细菌包括蓝细菌(B4)、伯克氏菌属(B23)、根瘤菌(B5、B24)以及3种不可培养细菌(B6-B8).与细菌相比,内生真菌DGGE图谱在不同器官之间的差异更小,大部分为共有条带,只是亮度有差异.当然也有特异条带,如曲霉属(F10)仅在鳞茎中出现.镰孢菌属(F11)以及2种不可培养的真菌(F5、F6)为根部特有.与细菌不同,地上茎中的真菌Shannon指数高(2 82),其次是鳞茎和根,叶低2.53.利用DGGE检测到浙贝母的内生真菌主要为侧齿霉、镰孢霉和曲霉,而利用传统方法还分离到交链孢霉、青霉、拟茎点霉、葡萄孢、卵形孢霉、枝链孢霉、毛壳菌、丝核菌以及束丝菌等属,说明对浙贝母而言,传统方法更适合.[结论]浙贝母不同器官中内生细菌和真菌的多样性及组成均存在差异,但地下鳞茎和地上茎差异较小;真菌的器官差异不如细菌明显.浙贝母内生菌的分布跟其它植物明显不同,其菌群组成主要取决于浙贝母宿主植物本身.不同的内生菌占据不同生态位,执行不同功能,有的对促进浙贝母的生长,而有的则影响生长,其中侧齿霉属值得进一步研究.
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天然蚬壳花椒种群遗传多样性的ISSR标记分析
目的:对采自中国西南4省共12个天然蚬壳花椒种群进行遗传多样性分析.方法:采用ISSR分子标记技术,从100条引物中筛选出8条条带扩增稳定、清晰可见和多态性条带明显的引物用于后续实验.结果:8条引物共扩增出150个条带,147个多态性条带,多态性条带百分率(PPB)为98.0％,各种群的PPB值为26.0％～62.0％.种内Shannon指数(Hsp)为0.4175,种群内Shannon指数(Hpop)为0.1328 ～0.3267.分子方差分析(AMO-VA)显示,种群间与种群内的变异数分别是总遗传变异数的47.98％和52.02％.结论:天然蚬壳花椒在物种和种群水平上均具有较高的遗传多样性,天然蚬壳花椒种群问(内)存在着高度的遗传分化.本研究为蚬壳花椒的遗传多样性分析奠定了理论基础.
