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狂犬病毒糖蛋白和核蛋白主要免疫活性位点的质粒载体构建
目的为进一步研究狂犬病毒糖蛋白和核蛋白免疫活性位点的免疫特性,构建了大肠杆菌重组质粒载体.方法参考有关文献及用蛋白质亲疏水性分析程序分析狂犬病毒糖蛋白、核蛋白,以确定目的基因,用分子克隆的方法将目的基因片段插入质粒载体,后测定重组质粒的核酸序列.结果在大肠杆菌质粒PUC18多克隆位点EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ之间,根据其阅读框架,插入了含有狂犬病毒糖蛋白主要免疫活性位点的目的基因合成片段:GⅡ免疫活性位点的第149～160位氨基酸残基及GⅢ免疫活性位点的第331～340位氨基酸残基所对应的碱基序列.在KS质粒多克隆位点EcoRⅠ和BamHⅠ间,插入了狂犬病毒核蛋白-免疫活性位点第374～383位氨基酸残基所对应的碱基序列.结论为深入研究狂犬病毒免疫活性位点的免疫特性及其基因免疫打下基础.
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Cyclin E和p21/WAF1/CIP1在结直肠癌组织中的表达及意义
目的:研究Cyclin E、p21/WAF1/CIP1蛋白在结直肠癌组织中的表达水平及其与生物学行为和预后的关系.方法:用免疫组化方法检测55例结直肠癌组织中P21/WAF1/CIP1、Cyclin E蛋白的表达.结果:10例癌旁结直肠组织中,Cyclin E表达均为阴性,55例结直肠组织中,34例Cyclin E表达阳性;10例癌旁结直肠组织中,p21表达均为阳性,55例结直肠癌组织中25例p21表达阳性;Cyclin E蛋白表达多见于浸润深、分化差、淋巴结转移、临床分期晚的结直肠癌组织中;p21/WAF1/CIP1蛋白表达多见于分化好、浸润浅、未发生淋巴结转移、临床分期较早的结直肠癌组织中;Cyclin E蛋白表达组的5年生存率低于阴性组;p21/WAF1/CIP1蛋白表达组的5年生存率高于阴性组.结论:Cyclin E、p21/WAF1/CIP1可作为反映结直肠癌恶性生物学行为及预后的指标.
