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果糖二磷酸钠片的有关物质研究
目的:建立果糖二磷酸钠片的有关物质检查方法.方法:采取薄层层析法和以键苯二胺为显色剂.结果:薄层层析法可控制果糖和6-磷酸果糖为0.5%,同原料控制限一致.结论:该方法灵敏度高,操作快捷、方便.
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6-磷酸果糖对肌腱细胞TGF-β及其受体表达的影响
目的 通过体外培养兔肌腱的腱鞘、腱外膜和腱内膜细胞,观察6-磷酸果糖对3种细胞TGF-β及其受体、TGF-β_1及TGF-β_1 mRNA表达的影响,探讨6-磷酸果糖在肌腱愈合粘连防治中的作用机制提供实验依据. 方法 成年新西兰大白兔8只,雌雄不限,体重4.0～4.5 kg.取兔前肢趾深屈肌腱分离培养腱鞘、腱外膜和腱内膜细胞.将每种细胞随机分为2组,实验组加入6-磷酸果糖培养,对照组不加入6-磷酸果糖.分别于培养3 d及24 h后采用酶联免疫吸附实验定量检测TGF-β及其受体的表达,原位杂交检测TGF-β1_mRNA的表达;免疫组织化学染色观测TGF-β_1的表达. 结果 酶联免疫吸附实验显示实验组各细胞TGF-β及其受体的表达均较对照组下降,差异有统计学意义(P<0.05).TGF-β_1表达平均降低程度从大到小依次为腱鞘细胞(36.1%)、腱内膜细胞(31.2%)、腱外膜细胞(31.0%),TGF-β_2,依次为腱鞘细胞(37.9%)、腱外膜细胞(32.1%)、腱内膜细胞(27.0%),TGF-β_3依次为腱内膜细胞(42.5%)、腱鞘细胞(41.2%)及腱外膜细胞(33.3%).TGF-β受体1、2表达平均降低程度从大到小依次为腱外膜细胞(29.9%、26.2%),腱内膜细胞(27.8%、23.5%),腱鞘细胞(23.1%、20.0%);TGF-β受体3依次为腱内膜细胞(26.1%)、腱外膜细胞(19.2%)、腱鞘细胞(15.8%).实验组各细胞TGF-β_1mRNA阳性表达率及细胞内TGF-β_1mRNA表达强度均较对照组明显降低,比较差异有统计学意义(P<0.05).免疫组织化学染色观察显示实验组各细胞TGF-β_1表达均较对照组明显降低. 结论 6-磷酸果糖能显著降低肌腱细胞的TGF-β及其受体、TGF-β_1及TGF-β_1mRNA的表达,为肌腱愈合过程中调节TGF-β水平提供了一种新途径.
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果糖二磷酸钠中6-磷酸果糖及果糖检测方法的研究
用纸电泳法分离检测果糖二磷酸钠中有关物质6-磷酸果糖及果糖,分离效果好,方法简便快速,检出灵敏度高.以枸橼酸盐缓冲液(pH 3.0)为电泳缓冲液,采用中速薄型定量层析滤纸作电泳滤纸,电压梯度18 V/cm,电泳80min,用盐酸间苯二胺乙醇液显色.以果糖二磷酸钠泳动距离为1.00,6-磷酸果糖和果糖的相对迁移率(n=12)分别为0.74±0.06、0.12±0.03.低检出量分别为果糖二磷酸钠2 μg,6-磷酸果糖5 μg,果糖0.25 μg.
