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悬浮培养与贴壁培养对乳腺癌MCF-7细胞形态及CD44、CD24表达的影响
目的 采用悬浮培养和贴壁培养两种方法分别孵育人乳腺癌MCF-7细胞株,观察细胞形态及干细胞标志物CD44、CD24的变化.方法 将乳腺癌MCF-7细胞株同时进行第一代悬浮培养和贴壁培养,用倒置显微镜观察悬浮细胞及贴壁细胞形态及生长方式,收集贴壁细胞及第二代悬浮细胞,对其表面分子CD24及CD44进行免疫荧光染色,荧光显微镜下观察细胞表面标志物的表达,同时采用流式细胞术检测不同亚群的细胞数量.结果 悬浮细胞以大小不等的微球方式进行生长,并在第二代悬浮培养中维持此生物学特性;贴壁细胞呈单层贴壁簇状生长.与贴壁细胞相比,CD44分子在悬浮细胞中表达含量增高,CD24分子表达含量减少.CD44+/CD24-/low表型细胞在悬浮细胞和贴壁细胞中所占比例分别为(87.0±0.43)%和(40.1±1.05)%(P<0.05);CD44+/CD24+表型所占比例分别为(11.7±0.39)%和(57.2±0.75)%(P<0.05).结论 悬浮培养法可使乳腺癌MCF-7细胞株贴壁细胞去分化,可富集CD44+/CD24-/low表型的乳腺癌干细胞.
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三阴性乳腺癌组织中干细胞CD44+/CD24-/low表型与预后的关系
目的:探讨CD44+/CD24-/low表型在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中的表达情况及其与三阴性乳腺癌的临床病理特征及预后的关系。方法从青岛市中心医疗集团乳腺癌数据库中筛选出2008年1月至2009年12月53例三阴性乳腺癌病人的石蜡标本,同时随机选取53例同时期相应临床分期的非三阴性乳腺癌(NTNBC)病人的石蜡标本。应用免疫组化技术进行CD44、CD24染色,将CD44+/CD24-/low表型在两组病人中的表达情况进行统计学分析,探讨其与三阴性乳腺癌的临床病理特征及预后的关系。结果 CD44+/CD24-/low(+)在TNBC组中为54.71%,明显高于NTNBC组(45.28)(P<0.05)。在TNBC组,临床病理分期Ⅲ期在 CD44+/CD24-/low(+)中有15例(28.30%),高于CD44+/CD24-/low(-)(9.43%)(P<0.05);局部复发率在CD44+/CD24-/low(+)和CD44+/CD24-/low(-)中分别为24.52%和5.66%(P<0.05);远处转移率分别为16.98%和3.77%(P<0.05)。TNBC组中,CD44+/CD24-/low(+)5年OS(62.00%)、DFS(51.00%)均低于CD44+/CD24-/low(-)5年OS(80.00%)、DFS(75.00%),两组间的差异有统计学意义。结论 CD44+/CD24-/low的高表达可能与三阴性乳腺癌的复发、转移及预后差有相关性。
关键词: 三阴性乳腺癌 CD44+/CD24-/low表型细胞 预后