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恒温核酸扩增文献资料
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滚环扩增体系及其应用研究进展
该文对新近发展起来的恒温核酸扩增技术中的滚环核酸扩增技术及其应用研究进展进行介绍.滚环扩增技术是借鉴病原生物体的滚环复制方式而提出的,它是一种多引物的指数的体外核酸扩增技术.不仅能直接扩增特定的DNA、RNA分子,而且能实现这些靶核酸的信号放大,其灵敏度能达到1个拷贝的核酸分子.滚环扩增技术在核酸测序、单核苷酸多态性基因分型及细胞原位检测分析、DNA芯片、蛋白质芯片分析等方面都有广泛的应用前景.
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沙门菌NASBA快速检测试剂的研制
目的:建立一种快速、简便的恒温核酸扩增(NASBA)方法.方法:用AMV RTase、RNase H、,T7RNA聚合酶以及相应的缓冲成分组成的恒温扩增系统,对dnak基因RNA序列进行扩增.结果:经50 min反应后均可扩增出预期120pb大小的产物,第1次PCR产物经转录实验后与NASBA直接扩增的产物具有较好的同源性,其灵敏度达到103CFU.结论:NASBA法对沙门菌检测具有良好的特异性和灵敏度.
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LAMP扩增技术在真假肉鉴别中的应用
目的 运用恒温核酸扩增(LAMP)技术,对茂名地区肉类及制品中掺假情况进行检测.方法 从茂名地区市场和超市中购买牛肉和羊肉制品,提取核酸后,运用LAMP技术进行检测.结果 LAMP技术对常见的牛肉、猪肉、鸡肉、鸭肉、羊肉、驴肉的检测都有比较好的特异性,检出限为0.23 μg/ml～0.53 μg/ml (DNA),检测时间≤40 min.通过检测发现牛肉制品中主要掺假肉类是猪肉和鸡肉,羊肉制品中主要掺假肉类是猪肉和鸭肉.结论 LAMP方法具有检出限低、前处理简单、特异性好、耐用性强、检测速度快等优点,能较好地满足肉类及制品中掺假检测的要求.
