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培养法与PCR法用于临床检测肺炎支原体的差异及药敏分析
目的 对比荧光定量PCR法与培养法临床检测肺炎支原体的差异,并进行相关药敏分析.方法 对我院198份临床呼吸道样本进行快速培养法与荧光定量PCR法的平行检测,对比两组检测结果,分析肺炎支原体对抗生素的耐药性.结果 培养法阳性检出率为22.73％,荧光定量PCR法阳性检出率为23.74％,两者差异不明显(P>0.05);抗生素耐药中以依托红霉素耐药性高,耐药率高达37.78％.结论 培养法与PCR法临床检测肺炎支原体的检测结果相差不大,且培养法装备成本要显著低于PCR法,适合临床推广使用.
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金标记免疫层析法测定沙眼衣原体检测下限的确定
目的 比较金标记免疫层析法与定量PCR的方法检测沙眼衣原体的结果 ,确定金标记免疫层析法检测沙眼衣原体的低下限.方法 25例临床标本同时进行金标记免疫层析法与定量PCR的方法检测,比较这两种检测方法的结果 差异.结果 定量PCR方法检测结果 拷贝数在105指数级的标本8例.其金标记免疫层析法检测2例为阴性,6例为弱阳性.结论 金标记免疫层析法检测沙眼衣原体的低下限为105拷贝数.
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寡核苷酸药物定量分析方法的研究进展
寡核苷酸作为治疗药物在抗肿瘤、病毒治疗、免疫调节等方面有着良好的应用前景.寡核苷酸药物的药代动力学的研究和质量控制均要求具备相应的定量分析方法.本文综述了近年来在寡核苷酸药物药代动力学评价及生产质量控制中常用的几种定量分析方法,主要包括质谱法、毛细管电泳法、定量PCR法以及杂交技术相关的方法,阐述了各方法的特点、应用前景及其新研究进展.
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丹参注射液体外对原代人软骨细胞的生物效应实验研究
目的:通过对丹参注射液对体外培养的原代人软骨细胞的生物效应分析,探讨其治疗骨关节炎的作用机理.方法:以丹参注射液丹参生药(1.5 mg·mL-1)作为计算药物浓度.药物分组:对照组、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg·mL-1.用MTT法评价原代人关节软骨细胞(第3代)增殖活性;用定量PCR法测定细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的表达量,评价软骨细胞的分化;用酶联免疫方法检测细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的含量;用糖胺多糖试剂盒法检测细胞总糖胺多糖的含量,评价软骨细胞的功能蛋白水平.结果:MTT实验结果显示,各浓度丹参注射液组的细胞相对活性均低于对照组,且降低趋势有量-效关系,提示丹参注射液对原代人关节软骨细胞有生长抑制效应.定量PCR结果显示,各浓度组细胞Ⅰ型胶原mRNA表达量均低于对照组,且有一定的量-效关系.Ⅰ型胶原蛋白检测结果显示,低剂量(≤2.0 mg·mL-1)组可显著抑制Ⅰ型胶原表达.结果提示低剂量的丹参注射液可能对原代人关节软骨细胞的脱分化有一定的抑制作用.同时,低剂量丹参注射液(≤4.0 mg·mL-1)能促进糖胺多糖的含量增加,提示低剂量丹参注射液有促进软骨形成的生物效应.结论:低剂量的丹参注射液可轻微抑制人第3代关节软骨细胞的增殖,抑制Ⅰ型胶原(脱分化指标)的形成和促进糖胺多糖的合成,提示其具有促进软骨形成的生物效应.
