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Brn-3a标记大鼠视网膜神经节细胞的实验研究
目的 对比Thy-1.1标记大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的方法,评估Brn-3a是否可作为一种可靠的内源性标记物,标记并计数大鼠RGCs. 方法 20只SD大鼠,随机选取大鼠一眼为Thy-1.1组,另一眼作为Brn-3a组,常规H-E染色镜下观察RGCs的形态,运用免疫组织化学法检测Brn-3a与Thy-1.1的表达情况,每只眼球取1张切片,在每张待测视网膜切片上,以视网膜后极部中点为起点,至近角膜缘视网膜止点处,将视网膜分为3等份,即中央区、中间区及周边区,每个区域视网膜随机取5个高倍视野,分别计数Thy-1.1、Brn-3a阳性细胞均数. 结果 光镜下正常大鼠的视网膜从内向外可见3个细胞核层,依次为神经节细胞层(GCL)、内核层(INL)、外核层(ONL).GCL的细胞呈单层排列,较为整齐,胞核清楚,数目相对较少,INL和ONL呈多层排列,且细胞排列紧密,数目相对较多.2种标记物染色都仅仅存在于视网膜的GCL,但在大鼠RGCs中分布呈明显差异:Brn-3a主要在胞核中着色,Thy 1.1主要在胞质中着色;运用此2种标记物标记计数RGCs,各个相同区域内Thy 1.1和Brn-3a阳性细胞计数比较,差别均无统计学意义(P>0.05).Thy-1.1组和Brn 3a组中央区、中间区和周边区两两比较,差别均有统计学意义(P<0.01). 结论 在大鼠视网膜中,Brn 3a可以作为一种比较可靠的内源性标记物,标记并计数大鼠RGCs.