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三重荧光RT-PCR文献资料
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两种麻疹病毒和风疹病毒三重实时荧光RT-PCR检测试剂应用比较的研究
目的 比较评价两种含内质控三重实时荧光RT-PCR检测试剂检测麻疹病毒和风疹病毒结果的差异.方法 对江西省市级麻疹风疹实验室上送的麻疹病毒或风疹病毒核酸阳性咽拭子标本进行复核,同时用两种含内质控的麻疹病毒和风疹病毒三重荧光RT-PCR试剂盒检测,并对检测结果进行比较分析.结果 麻疹病毒和风疹病毒核酸阳性咽拭子标本符合率分别为95.12%和100.00%;两种试剂检测麻疹病毒特异度和灵敏度均较好;试剂A和试剂B检测风疹病毒特异度较好,灵敏度分别为71.43%和100%;试剂A和试剂B检测人RNase P核酸灵敏度分别为100%和92.73%.结论 试剂A在对麻疹病毒核酸检测方面具有较高的敏感度及特异度,有较高应用和推广价值.
关键词： 麻疹病毒 风疹病毒 三重荧光RT-PCR -
腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒三重荧光RT-PCR快速检测的研究分析
目的 利用荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的方法.方法 从GenBank随机下载腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的目的基因,通过MEGA分析,利用Primer Express3.0软件设计三对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR来建立和优化反应体系.10倍稀释阳性对照,来检验建立体系的灵敏度和重复性.利用具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性.结果 建立了一个单管对腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒进行检测的三重荧光RT-PCR反应体系.该体系的检测灵敏度为102 copies/μl,扩增效率分别为92.24％、96.95％和99.70％,标准曲线的相关系数大于99％,重复性变异系数＜3.5％,特异性实验未发现有非特异性扩增.结论 建立的三重荧光可以快速、准确地检测腺病毒、合胞病毒和博卡病毒.
关键词： 腺病毒 呼吸道合胞病毒 博卡病毒 三重荧光RT-PCR
