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PUMA/ASPP1双抑癌基因对胃癌 SGC-7901细胞增殖的影响
目的:探讨 p53正向细胞凋亡调控因子(p53 up-regulated modulator of apoptosis protein,PUMA)/p53促凋亡蛋白(apoptosis stimulating protein of p53,ASPP)1融合基因及单个基因对胃癌 SGC-7901细胞的杀伤作用。方法通过脂质体(lipofectamine)2000TM 将 PUMA/ASPP1融合基因及 PUMA、ASPP1单个基因分别转染胃癌SGC-7901细胞系[实验设5组,分别为胃癌细胞无转染空白对照(SGC-7901)组,空载质粒转染细胞对照(SGC-7901-pcDNA3.1)组以及重组 ASPP1质粒转染细胞实验(SGC-7901-ASPP1)组、重组 PUMA 质粒转染细胞实验(SGC-7901-PUMA)组、重组 PUMA/ASPP1质粒转染细胞实验(SGC-7901-PUMA/ASPP1)组],再次经 G418筛选,获得稳定表达融合基因 SGC-7901-PUMA/ASPP1细胞株。通过 MTT 法及使用流式细胞仪测定各组胃癌SGC-7901系细胞的存活数(光吸收度即 A 值)及细胞周期。结果SGC-7901组与 SGC-7901-pcDNA3.1组 A 值比较差异无统计学意义(P >0.05);SGC-7901-ASPP1组、SGC-7901-PUMA 组和 SGC-7901-PUMA/ASPP1组 A值明显低于 SGC-7901组与 SGC-7901-pcDNA3.1组(均 P <0.01);SGC-7901-ASPP1组、SGC-7901-PUMA 组和SGC-7901-PUMA/ASPP13组中,SGC-7901-PUMA/ASPP1细胞组 A 值低(P <0.01)。与 SGC-7901组、SGC-7901-pcDNA3.1组比较,SGC-7901-ASPP1、SGC-7901-PUMA、SGC-7901-PUMA/ASPP1组的 G1期明显增多,S 期明显减少,尤以 SGC-7901-PUMA/ASPP1组 S 期减少为甚(均 P <0.01);SGC-7901-pcDNA3.1组与 SGC-7901组比较 G1期、S 期差异无统计学意义(P >0.05)。结论双抑癌基因可有效抑制胃癌 SGC-7901系细胞增殖,双抑癌基因较单个抑癌基因具有更强的抗肿瘤作用。
关键词: p53 正向细胞凋亡调控因子 p53 促凋亡蛋白 胃癌细胞 增殖 抑制