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C57BL/6 FMR1基因敲除小鼠保种体系研究
目的:通过活体繁殖或胚胎冷冻方式建立 FMR1基因敲除(C57BL/6 FMR1 KO)小鼠的保种技术体系.方法:繁殖保种方式选取发育成熟的C57BL/6 FMR1 KO种鼠,按照1∶1全同胞兄妹近亲繁殖,采用原始修饰平行线并进行谱系记录,结合PCR检测基因型验证.低温保种方式选取4～6周正常C57BL/6J雌鼠超排处理获取卵子,3～6月龄FMR1基因敲除雄鼠获取精子,基于体外受精和胚胎冷冻、复苏、移植等技术,通过PCR检测鉴定子代基因型,终建立该C57BL/6 FMR1 KO小鼠品系胚胎冻存技术.结果:(1)C57BL/6 FMR1 KO小鼠活体繁殖保种记录3代,并基于交配对数、祖系亲缘关系和生殖能力系数绘制谱系图,结果显示小鼠品系繁殖状况良好,繁殖性能稳定.(2)胚胎冷冻保种方式总计冻存胚胎435枚,受精率71％,移植验证所产后代雄鼠均为野生型,雌鼠均为FMR1基因敲除杂合子.结论:通过活体繁殖或胚胎冷冻方式均可对C57BL/6 FMR1 KO小鼠进行品系保种.而胚胎冷冻方式更为简便、快速、不受污染,并有效解决基因修饰的小鼠雌性不育和生殖能力低下等问题.
关键词： 活体保种 胚胎冷冻 胚胎移植 FMR1基因敲除小鼠
