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冷冻复苏过程对人精子印记基因SNRPN和GRB10DNA甲基化及表达的影响
目的 探讨精液冷冻复苏过程对人精子印记基因SNRPN、GRB10甲基化状态和mRNA表达的影响.方法 将20份人精液标本平行分为2组:新鲜组(n=20)和冷冻组(n=20).采用计算机辅助精子分析(CASA)进行两组精液的常规参数检测;Percoll密度梯度离心法纯化精子,SNRPN、GRB10基因的甲基化率采用SequenomDNA测序分析;SNRPN、GRB10基因的mRNA表达采用qRT-PCR定量分析.结果 冷冻组精子浓度、精子活力、前向运动精子百分比均低于新鲜组(P＜0.05),冷冻组不活动精子百分比显著高于新鲜组(P＜0.05);冷冻组精子SNRPN mRNA表达显著低于新鲜组(P＜0.05);冷冻组精子GRB10启动子区亚片段检测的-902CpG位点(即转录起始点上游989 bp处)的甲基化率显著下降(P＜0.05);GRB10mRNA表达较新鲜组显著升高(P＜0.05).结论 冷冻复苏过程影响人精子GRB10、SNRPN基因的DNA甲基化和mRNA表达,提示精子库常规使用的精液冻储技术可能改变配子的表观遗传信息,进而调控基因的表达.
