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NF-κB寡核苷酸诱骗剂诱导的大鼠耐受型树突状细胞及其免疫学特性观察
目的 用核因子κB(NF-κB)寡核苷酸诱骗剂(ODN Decoy)诱导大鼠耐受型树突状细胞(DC)并负载牛Ⅱ型胶原(BⅡC),评价其免疫学特性.方法 用GM-CSF和IL-4诱导SD大鼠脾脏单个核细胞分化成DC,将其分为对照组及实验1、2组,均继续加入GM-CSF、IL-4,同时实验1、2组加入ODN Decoy,培养7d实验2组加入BⅡC.流式细胞术检测细胞表面共刺激分子CD80、CD86,同种异体淋巴细胞刺激试验评价淋巴细胞增殖情况及其对BⅡC和人血清刺激的反应,检测上清液中Th1/Th2细胞因子IFN-γ/IL-10.结果 与对照组相比,实验1、2组CD80、CD86表达均降低(P均＜0.05);实验1组淋巴细胞增殖程度及IFN-γ明显降低(P均＜0.05),IL-10无明显变化;实验2组加入BⅡC后淋巴细胞增殖程度及IFN-γ、IL-10均无明显变化(P均＞0.05).实验2组中,与加入BⅡC相比,加入健康人血清后淋巴细胞明显增殖(P＜0.05),IFN-γy升高,IL-10降低(P均＜0.05).结论 用NF-κBODN Decoy成功诱导获得耐受型DC.该DC刺激同种异体淋巴细胞反应的能力较低,且抑制淋巴细胞免疫反应向Th1方向偏移;负载BⅡC后刺激的淋巴细胞对该抗原特异性耐受,而对无关抗原的免疫应答无明显影响.
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核因子κB诱骗剂处理的树突状细胞延长小鼠移植心脏存活时间
目的 探讨核因子κB(NF-κB)诱骗剂处理供者树突状细胞(DC)对同种异体小鼠移植心脏存活时间的影响.方法 在体外以NF-κB诱骗剂处理供者骨髓来源的DC,并于心脏移植术前7d经门静脉输注2×106个DC给受者,术后1～7 d受者接受亚治疗量的环孢素A(10mg·kg-1·d-1)腹腔注射(联合方案组),并设不作任何处理(对照组)、单用环孢素A(CsA组)、单纯输注未经处理DC(DC对照组)和单纯输注经处理DC(DC实验组)的对照组,另设接受来自第三方供者的对照组(第三供者组,受者的处理同联合方案组),所有受者均接受腹腔心脏移植.观察各组移植心脏的存活时间;采用酶联免疫吸附法检测术后第7天受者血清白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-10和γ干扰素(IFN-γ)的含量.结果 移植心脏平均存活时间(MST),对照组为7 d,CsA组为10.3 d,DC对照组为7.6 d,DC实验组为21.4 d,联合方案组为53.6 d,第三供者组为9 d,DC实验组移植心脏MST明显长于对照组和DC对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);联合方案组移植心脏MST明显长于CsA组、DC实验组及第三供者组,差异有统计学意义(P＜0.01).联合方案组IL-2和IFN-γ的含量低,而IL-4和IL-10的含量高,与其它各组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组、DC对照组及CsA组相比,DC实验组IL-2及IFN-γ的含量也显著降低(P＜0.05),而IL-4和IL-10则升高(P＜0.05).结论 术前输注经NF-κB诱骗剂处理的供者DC可延长同种小鼠移植心脏的存活时间,若术后加用短程亚治疗量CsA,则移植心脏的存活时间得到进一步延长.
