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人胚肾293A细胞文献资料
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CXCR4-shRNA重组腺病毒表达载体的构建及鉴定
目的 选择性构建CXC趋化因子受体4(CXCR4)的特异RNA干扰载体.方法 在GenBank中获取CXCR4基因的核苷酸序列,设计并合成3条短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,并克隆到PL-Dest腺病毒骨架载体(shpAd/PL-Dest)中,组成人趋化因子受体重组腺病毒基因沉默子(shpAd-hCXCR4-eGFP),采用酶切、PCR和DNA测序方法验证.将验证后3种沉默子经酶切后转染至HEK293A细胞包装病毒,得到CXCR4的腺病毒表达载体.结果 构建的shRNA-Ad-hCXCR4-eGFP 3种基因沉默子序列正确并成功克隆到腺病毒表达载体上.结论 成功构建CXCR4-shRNA腺病毒表达载体.
关键词： CXC趋化因子受体4 RNA干扰 重组腺病毒载体 人胚肾293A细胞
