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ZEB2基因沉默对胃癌细胞奥沙利铂耐药性的影响
目的 探讨转录因子E盒结合锌指蛋白2 (ZEB2)基因沉默对胃癌细胞奥沙利铂(L-OHP)耐药性的影响.方法 采用体外间歇刺激法建立胃癌L-OHP获得性耐药细胞株SGC-7901/L-OHP,MTT法检测SGC-7901及SGC-7901/L-OHP细胞对L-OHP的化疗敏感性,并计算SGC-7901/L-OHP的细胞耐药指数(RI);蛋白免疫印迹法检测SGC-7901及SGC-7901/L-OHP细胞中ZEB2蛋白表达;在SGC-7901/L-OHP细胞中,应用小于扰RNA片段(siRNA)干扰法沉默ZEB2基因表达,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting法检测siRNA-ZEB2对ZEB2基因的沉默效率.沉默ZEB2基因表达后,MTT法检测SGC-7901/L-OHP细胞对L-OHP的化疗敏感性,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况.结果 对L-OHP耐药的胃癌细胞株SGC-7901/L-OHP建立成功,且细胞的RI为7.69.与SGC-7901细胞相比,耐药细胞SGC-7901/L-OHP中ZEB2蛋白表达增加(P＜0.05);qRT-PCR和Western blotting 结果显示,沉默ZEB2基因后,SGC-7901/L-OHP细胞中ZEB2的mRNA和蛋白表达均降低(P均＜0.05);MTT实验结果显示,si-ZEB2组SGC-7901/L-OHP细胞的IC50值为(27.06±7.43) μg/mL,低于空白对照组的(100.7±14.43)μg/mL和NC组的(91.95±16.43) μg/mL(P均＜0.05).si-ZEB2组、空白对照组、NC组SGC-7901/L-OHP细胞凋亡率分别为55.32％±9.63％、20.63％±3.28％、22.83％ ±4.81％,si-ZEB2组与空白对照组、NC组比较,P均＜0.05.结论 沉默ZEB2基因表达能增加胃癌细胞对L-OHP的化疗敏感性.
关键词： 胃癌 奥沙利铂 转录因子E盒结合锌指蛋白2 耐药
