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KLF16对胃癌细胞增殖、克隆能力的影响及机制
目的 探讨Krüppel样转录因子16(KLF16)对胃癌细胞增殖、克隆能力的影响及机制.方法 取处于对数生长期的BGC-823和SGC-7901细胞,每种细胞分为3组,sh-KLF161#、2#、3#组采用脂质体Lipofectamine 3000,分别将sh-KLF161#、sh-KLF162#、sh-KLF163#转染至细胞中,sh-NC组将shRNA无关序列转染至细胞中,以不转染shRNA的细胞为空白对照组.Real-time PCR法检测KLF16 mRNA相对表达量.CCK-8法检测胃癌细胞增殖活性,细胞克隆形成试验检测胃癌细胞克隆能力.Western blotting法检测细胞中细胞周期相关蛋白p21和细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)的表达.结果 BGC-823细胞中,空白对照组,sh-NC组,sh-KLF161#、2#、3#组KLF16 mRNA相对表达量分别为1.13±0.10、1.06±0.15、0.57±0.11、0.72±0.14、0.39±0.13;SGC-7901细胞中,空白对照组,sh-NC组,sh-KLF161#、2#、3#组KLF16 mRNA相对表达量分别为1.09±0.12、1.02±0.14、0.59±0.15、0.53±0.11、0.31±0.15;两种细胞中,sh-KLF16#3组的KLF16 mRNA相对表达量低于sh-KLF16#1组和sh-KLF16#2组(P均<0.05).在BGC-823和SGC-7901细胞中,干扰KLF16基因表达后,细胞增殖受抑制.BGC-823细胞中,空白对照组、sh-NC组、sh-KLF163#组细胞克隆数目分别为(180.45±19.32)、(189.83±22.43)、(109.32±24.31)个,SGC-7901细胞中,空白对照组、sh-NC组、sh-KLF163#组细胞克隆数目分别为(148.41±21.43)、(152.95±24.75)、(87.82±18.43)个,sh-KLF163#组细胞克隆数目低于空白对照组、sh-NC组(P均<0.05).在BGC-823和SGC-7901细胞中,干扰KLF16基因表达后,p21蛋白表达增加(P均<0.05),而CDK4蛋白表达下降(P均<0.05).结论 干扰KLF16基因表达,可抑制细胞增殖和克隆形成能力,其机制可能与上调p21蛋白和降低CDK4蛋白表达有关.
