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转染tbx2 siRNA对人前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化的影响
目的 观察转染T-BOX转录因子2(tbx2)小干扰RNA(siRNA)对人非雄激素依赖性前列腺癌PC3细胞和雄激素依懒性前列腺癌LNCaP细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 将体外培养的人前列腺癌PC3细胞随机分为观察组和对照组,通过SiLentFectTM Lipid Reagent技术分别转染tbx2 siRNA和阴性对照siRNA,继续培养48 h.采用Western blotting法检测两组细胞中tbx2蛋白相对表达量.采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测两组细胞增殖活性(以OD450表示).采用Transwell迁移实验检测两组细胞迁移细胞数.采用Transwell侵袭实验检测两组细胞侵袭细胞数.采用Western blotting法检测两组细胞EMT相关标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维黏连蛋白(Fibronectin)及EMT相关上游转录因子Snail、Twist的表达.另取LNCaP细胞进行相同实验.结果 转染48 h后观察组、对照组PC3细胞中tbx2相对表达量分别为0.345±0.016、0.723±0.031,LNCaP细胞中tbx2相对表达量分别为0.315±0.006、0.692±0.010.观察组PC3、LNCaP细胞中tbx2相对表达量均低于对照组(P均<0.05).将转染后的两种前列腺癌细胞继续培养24、48、72 h后,PC3细胞对照组OD450值分别为0.487±0.026、0.868±0.031、1.387±0.107,观察组分别为0.315±0.022、0.550±0.027、0.765±0.046.LNCaP细胞对照组OD450值分别为0.388±0.032、0.722±0.032、1.187±0.135,观察组分别为0.251±0.021、0.450±0.037、0.625±0.066.相同时间点观察组PC3、LNCaP细胞OD450低于对照组(P均<0.05).观察组与对照组PC3细胞迁移细胞数分别为(118.67±6.11)、(292.33±5.03)个;LNCaP细胞迁移细胞数分别为(85.67±4.31)、(192.33±8.07)个.观察组PC3、LNCaP细胞迁移数目均低于对照组(P均<0.05).观察组,对照组PC3细胞侵袭细胞数分别为(89.00±3.02)、(186.33±5.84)个;LNCaP细胞侵袭细胞数分别为(81.67±3.42)、(232.33±7.42)个.观察组PC3、LNCaP细胞迁移数目均低于对照组(P均<0.05).观察组PC3、LNCaP细胞E-adherin表达高于对照组(P均<0.05);N-cadherin、Vimentin、Fibronectin及Snail、Twist相对表达量低于对照组(P均<0.05).结论 转染tbx2 siRNA可以抑制细胞增殖,降低细胞迁移及侵袭能力,抑制细胞EMT过程.
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肝细胞癌组织中前列腺干细胞抗原、piwi样蛋白1和T-box转录因子2的表达分析
目的 探讨前列腺干细胞抗原(prostate stem cell antigen,PSCA)、piwi样蛋白1(piwi-like 1,PIWIL1)和T-box转录因子2 (T-box transcription factor 2,TBX2)的表达在肝细胞癌(HCC)中的临床意义.方法 收集2000～2003年HCC和相应癌旁正常组织所制备的石蜡切片各64例,应用免疫组织化学SP方法检测石蜡切片中PSCA,PIWIL1和TBX2蛋白的表达,分析三者的表达与HCC患者临床病理指标的关系.结果 在64例HCC的癌旁正常组织中,PSCA,PIWIL1和TBX2的表达率分别为17％ (11/64),0％(0/64)和9％(6/64),而HCC中三者的表达率分别为73％ (47/64),19％(12/64)和75％ (48/64),PSCA,PIWIL1和TBX2的表达明显高于癌旁正常组织(x2=40.859,13.241,56.505,P均＜0.05);PSCA,PIWIL1和TBX2的表达均与患者性别、年龄无明显相关性(x2=0.651～3.864,P值均＞0.05),但是均与临床分期有关(x2=12.923～39.511,P值均＜0.05);PSCA的表达率随着HCC的病理分级而升高(x2=18.047,P=0.000),而PI-WIL1和TBX2的表达则与病理分级无明显相关性(x2=3.356～5.688,P值均＞0.05);除了PIWIL1以外(x2=3.156,P=0.078),PSCA和TBX2的表达与淋巴结转移有相关性(x2=6.409～8.466,P值均＜0.05);PSCA和PIWIL1的免疫染色定位于肝细胞的胞浆中,而TBX2则定位于肝细胞的胞浆和胞核中.结论 PSCA,PIWIL1和TBX2在HCC中的表达研究为HCC发生发展分子机制提供了新的资料,PSCA和TBX2可能会成为治疗肝细胞癌的分子靶点.
关键词： 肝细胞癌 前列腺干细胞抗原 piwi样蛋白 T-BOX转录因子2 -
TBX2在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义
目的 检测TBX2在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达情况,探讨其对PTC临床病理学特点的影响.方法 使用免疫组化法检测TBX2在91例PTC中的表达情况,并统计分析其与患者性别、年龄、肿瘤直径、多灶性、甲状腺被膜外侵犯及颈部淋巴结转移等特点的相关性.结果 71.4％(65/91)的PTC病例存在TBX2高表达;高表达组中,64.6％(42/65)的病例肿瘤直径>1cm,明显高于TBX2低表达组(64.6％vs33.3％,x2=9.112,P=0.003);TBX2高表达的病例具有更多的多灶性(70.8％vs50％,x2=4.115,P=0.043)、被膜外侵犯(60.0％vs34.6％,x2=4.801,P=0.028)和更多发的颈部淋巴结转移(44.7％vs23.1％,x2=5.815,P=0.013).结论 TBX2阳性高表达可能是PTC恶性程度高、直径大、淋巴结转移多的原因之一,可以为PTC恶性程度判断及预后预测提供重要的参考指标.
关键词： 甲状腺乳头状癌 T-BOX转录因子2 免疫组织化学法 颈部淋巴结转移
