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白细胞介索-10文献资料
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白细胞介素-10基因转染对大鼠肝细胞表达细胞因子的影响
目的 观察转染白细胞介素-10(IL-10)基因后肝细胞表达细胞因子的变化,探讨IL-10基因修饰的大鼠肝细胞抑制肝星状细胞(hepatic stallete cells,HSC)活化的可能机制.方法 体外培养大鼠肝细胞系BRL,分3组:对照组(C组)、转染pcDNA3.0空质粒组(P组)、转染pcDNA 3.0-rIL-10重组质粒组(Ⅰ组).转染48 h后取培养上清液用抗体芯片筛选各组间细胞因子的差异性表达.用ELISA试剂盒分别检测上清中血管表皮生长因子(VEGF)和转化生长因子-β(TGF-β)的变化.抽提3组BRL细胞的总蛋白,用Western blotting方法检测细胞内VEGF蛋白表达的变化.结果 抗体芯片筛选显示,Ⅰ组较P组IL-10表达上调大于50倍,而VEGF下调大于2倍.进一步检测显示,Ⅰ组培养上清液中VEGF的表达(136.824±34.150) pg/ml较P组(252.026±33.300)pg/ml显著下降(P＜0.05),Ⅰ组培养上清液中TGF-β的表达(220.296±42.115) pg/ml较P组(363.366±17.434)pg/ml显著下降(P＜0.01),Ⅰ组细胞中VEGF的表达较P组也显著下降(P＜0.01).结论 转染IL-10基因的大鼠肝细胞除了通过高分泌IL-10直接抑制HSC的增殖与活化,也可能通过下调VEGF和TGF-β等促肝纤维化细胞因子的表达而间接作用.
