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骨髓间充质干细胞对高低转移潜能肝癌细胞影响的实验研究
目的 观察人骨髓间充质干细胞(hMSC)对高低转移潜能肝癌细胞(MHCC97-H和MHCC97-L)侵袭能力和增殖能力的影响.方法 Transwell法检测hMSC对高低转移潜能肝癌细胞侵袭能力的影响,下室加入培养基和hMSC,上室加入高低转移潜能肝癌细胞悬液,共培养36 h,酶标仪吸光度(optical density,OD)值检测及细胞计数法观察侵袭能力的变化.CCK-8法检测hMSC对高低转移潜能肝癌细胞增殖能力的影响.PCR检测共培养前后转移相关因子骨桥蛋白(OPN)、唾液酸蛋白(BSP)、o-Ⅴ基因、增殖相关基因TGFβ1和PDC D4的表达差异.结果 (1)侵袭能力检测结果:与对照组比较,镜下观察实验组高低转移潜能肝癌细胞迁移数量明显减少,OD值两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).MHCC97-H与hMSC共培养后OPN、BSP表达明显下降(P＜0.05),而α-Ⅴ表达无明显变化(P＞0.05).MHCC97-L与hMSC共培养后OPN、BSP、α-Ⅴ表达均显著下降(P＜0.05).(2)增殖能力检测结果:与对照组比较,实验组高低转移潜能肝癌细胞OD值明显增高(P＜0.05),实验组TGFβ1基因表达上调(P＜0.05),而PDC D4基因表达在两组间差异无统计学意义(P＞0.05),在MHCC97-L实验组PDCD4基因表达上调(P＜0.05).结论 hMSC使高低转移潜能肝癌细胞的侵袭能力下调,增殖能力增强.
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hMSC对高转移潜能肝癌模型影响的实验研究
目的 观察人骨髓间充质干细胞(hMSC)移植入动物模型对肝癌组织的影响情况及对肝癌转移潜能影响.方法 制作高转移潜能动物模型,实验组在接种肿瘤后第7日开始尾静脉注射hMSC,5×105cells/次,2次/周,对照组尾静脉注射hMSC细胞培养液,0.2 ml/次,实验开始后每4天用测量肿瘤体积,肿瘤接种后14天(2周)、21天(3周)、28天(4周)、35天(5周)、42天(6周)处死动物,称重,取瘤块,称瘤重,计算肿瘤重量抑制率.PCR检测动物模型标本转移相关因子OPN、BSP、α-V基因的表达,及肿瘤标本凋亡相关因子Bcl2、Bax、Caspase3基因的表达.结果 在第3周时肿瘤的重量抑制率效果好,随着时间的延长,肿瘤的抑制率逐渐下降.肝癌转移相关的生物学指标均呈逐渐下降趋势,代表肿瘤凋亡指标的因子呈两极分化表现,抗凋亡Bcl2因子呈逐渐下降的趋势,凋亡因子Bax、Caspase3呈逐渐升高的趋势.结论 hMSC对肝癌动物模型肿瘤抑制效能随时间而变化,hMSC移植后第3周对肝癌抑制效果显著,随着时间的延长,抑制效能减弱.hMSC对肝癌的转移潜能具有抑制作用.
