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肠紧密连接ZO1蛋白测定对药物治疗溃疡性结肠炎大鼠疗效的评价
目的 测定肠紧密连接ZO1蛋白,用其评价美沙拉嗪和蒙脱石散单独或联合治疗2-4-6三硝基苯磺酸/乙醇诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜变化,探讨UC肠黏膜屏障损伤和修复的相关机制.方法将清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组、蒙脱石散组、美沙拉嗪联合蒙脱石散组.适应性喂养3d予2-4-6三硝基苯磺酸液灌肠建模,建模满24h予每组大鼠相应的药物灌胃治疗.于灌胃治疗12 d时取大肠标本行病理组织学观察,同时使用免疫组织化学Elivision法及实时荧光定量PCR法检测肠紧密连接ZO1蛋白的表达.结果 造模24h,光镜及电镜下观察的大鼠结肠组织显示建模成功.灌胃治疗12 d时,各组间疾病活动指数评分比较显示,蒙脱石散组[(0.72±0.29)分]、美沙拉嗪组[(0.95±0.38)分]、美沙拉嗪联合蒙脱石散组[(0.60±0.00)分]均低于模型组[(1.18±0.53)分],组间比较差异有统计学意义(F=3.172,P=0.047);各组间ZO1蛋白比较显示,蒙脱石散组(0.52 ±0.28)、美沙拉嗪组(0.35±0.17)、美沙拉嗪联合蒙脱石散组(0.78±0.13)均高于模型组(0.25±0.21),组间比较差异有统计学意义(F =7.025,P=0.001);各组间ZO1-mRNA比较显示,蒙脱石散组[(49.53±13.32)×10-4]、美沙拉嗪组[(43.50±18.60)×10-4]、美沙拉嗪联合蒙脱石散组[(78.12±21.81) ×10-4]均高于模型组[(16.60±23.23)×10-4],组间比较差异有统计学意义(F=10.660,P=0.000).结论 测定肠紧密连接ZO1蛋白,有助于认识UC的发病机制,从而指导治疗.以美沙拉嗪联合蒙脱石散用于UC时,肠紧密连接ZO1蛋白表达升高更为明显.
