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9聚精氨酸文献资料
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偶联穿膜肽携带外源蛋白进入眼球的研究
目的 探讨以多聚精氨酸为载体,是否能够将外源蛋白质穿透细胞膜甚至穿透眼球屏障.方法 本研究以9聚精氨酸(R9)为穿膜肽,构建R9-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)、GFP两种重组蛋白.体外实验中,将GFP、R9-GFP与人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)共培养后,经流式细胞仪、激光共聚焦显微镜及MTT法检测二者进入HLEC的能力及对HLEC的影响.体内实验中,将GFP、R9-GFP分别通过滴眼的方式作用于小鼠眼球,7d后裂隙灯下观察后提取眼球总蛋白,ELISA法检测眼球中重组蛋白的含量.结果 MTT结果显示,R9-GFP、GFP都不影响HLEC的增殖活力.流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测结果显示,R9-GFP可以快速有效地进入HLEC内部且效果与给药剂量呈正相关.体内实验中,裂隙灯观察结果示,GFP、R9-GFP作用后小鼠眼球均未发现异常;ELISA检测结果显示,R9-GFP可以进入眼球内部.结论 R9具有携带蛋白质进入细胞膜甚至穿透眼球屏障的能力.本研究为眼部用药及给药模式的进一步改良提供了基础.
