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Thapsigargin防治兔眼后发性白内障的研究
目的 探讨thapsigargin(TG)对兔眼后发性白内障形成的影响.方法 所有兔眼均行晶状体囊外摘出术.术后实验组(右眼)晶状体囊袋内分别注入0.1mL TG(A组:0.3μmol/L;B组:1μmol/L);对侧眼(左眼)注入含相同溶剂的BSS液.术后第1、3、7、10、15、35d应用裂隙灯显微镜观察眼前节的炎症反应及晶状体后囊膜混浊情况.术后第35d,Odrich法评估中央区后囊膜混浊程度.摘除眼球行组织病理学检查.结果 1μmol/L TG组兔眼后发性白内障的形成明显受到抑制,但存在明显的术后早期眼前节炎症反应(结膜充血、角膜水肿、前房混浊等),于术后第15d左右消退.0.3μmol/L TG组眼炎症反应相对较轻,形成后发性白内障的时间较短,与对照组比较差异无统计学意义(P＜0.05).组织病理学检查结果显示所有兔眼均未发现明显的炎性细胞浸润,1μmol/L TG组兔眼后囊膜区存在增生的晶状体上皮细胞(LECs).结论 高浓度TG能够延缓兔眼后发性白内障的发展,但早期炎症反应较重,毒性反应明显.
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ThaPsigargin对人晶状体上皮细胞系SRA01/04增殖抑制的作用机制
[目的]研究thapsigargin(TG)对体外培养的人晶状体上皮细胞系SRA01/04增殖的影响,并探讨其分子机制.[方法]不同浓度TG处理SRA01/04细胞72 h,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖;流式细胞仪(PI法)检测细胞周期改变;透射电镜观察细胞超微结构变化;TUNEL法检测细胞核中DNA的断裂情况;激光共焦显微镜和流式细胞仪检测Caspase3活性亚单位(17/19 ku)的表达及阳性细胞表达率.[结果]MTT法测得TG为0.325～5 μmol/L时,细胞增殖抑制率变化显著,IC50大约为0.8 μmol/L;透射电镜显示TG处理SRA01/04细胞膜皱缩,染色体浓缩、边集、核膜裂解、凋亡小体形成;流式细胞仪(PI法)及TUNEL法检测TG浓度为0,0.1,0.5,1,10 μmol/L分别处理SRA01/04细胞72 h,细胞凋亡率随浓度的增加而增加,呈浓度依赖性;TG处理后细胞Caspase3阳性表达率也呈浓度依赖性增加,TG为10 μmol/L时,几乎每个细胞浆内Caspase3都被激活.[结论]Thapsigargin可能通过激活Caspase3为诱导体外培养的人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞凋亡而抑制其增殖,TG为预防后发性白内障的药物研究提供了基础.
关键词： thapsigarigin 晶状体上皮细胞 细胞凋亡 Caspase3
