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SLC22A12文献资料
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SLC22 A12瞬时转染HEK293细胞模型的建立与鉴定
目的:构建SLC22A12瞬时转染HEK293细胞模型并进行鉴定.方法:构建GV142-SLC22A12重组质粒,并优化质粒转染人胚肾细胞HEK293的条件.通过qRT-PCR和Western blot检测SLC-HEK293细胞中SLC22A12 mRNA和hURAT1蛋白的表达情况,借助超高效液相色谱-串联质谱法考察尿酸钠摄取能力.结果:HindⅢ和EcoRⅠ双酶切和测序验证显示GV142-SLC22A12质粒构建成功,佳转染条件为2μg质粒,试剂(μL):质粒(μg)=3:1.与HEK293细胞相比,SLC-HEK293细胞中SLC22A12 mRNA和hURAT1蛋白表达量上调(P<0.001);尿酸钠摄取能力更强(P<0.05).结论:成功建立了SLC22A12瞬时转染HEK293细胞模型.
