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TTV在非甲至非庚型肝炎中感染的检测和分析
目的研究新近报导的1种与输血后肝炎有关的病毒(TTV)在中国郑州地区非甲至非庚型肝炎患者中的感染和基因序列变异情况.方法采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应(nested-PCR)方法对非甲至非庚型肝炎患者和正常人血清标本进行检测,并对非甲至非庚型肝炎患者中的TTV分离株进行序列测定.结果 TTV DNA在40例非甲至非庚型肝炎患者中检出18例,阳性率为45%,在96例正常人中检出17例,阳性率为17.7%,两组阳性率相比差异有统计学意义.TTV分离株序列与日本株(CLON22)相对应位置的核苷酸同源性为99.1%.结论 TTV在非甲至非庚型肝炎患者中的感染率较高,可能是非甲至非庚型肝炎的主要致病因子.TTV分离株与日本株可能属同一基因型.
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新西兰长耳兔作为TTV感染动物模型初步研究
为了探讨TTV是否能在新西兰长耳兔（以下简称兔）复制,我们进行了TTV对兔传代感染试验，证明它能感染也能传代。一、材料与方法１. 实验动物：由湖南省卫生防疫站提供成年新西兰兔。2. 第一代感染实验：收集六份非甲至非庚型肝炎TTV阳性血清，每只兔由耳静脉注射阳性血清１ml，定期采血（感染前采血，感染后每周采血一次），分离血清，当天检测生化指标，血清标本于－20℃保存备用。第二、第三代感染试验，用四只兔进行接种，其中２只兔感染成功继续接种，方法与第一代实验相同。将第二代感染成功兔血清1ml接种于第三代兔体内。3. 感染指标及测定方法：(1)标本中TTV DNA的检测，用nest－PCR方法检测血清中TTV DNA。(2)生物化学指标检测：对感染兔进行系列采样，定期测定ALT和直接、间接胆红素等各项指标的变化。(3)感染兔体内TTV DNA基因的克隆及序列测定：从感染TTV的血清标本中克隆TTV的部分基因进行序列测定，操作按常规进行,对测定序列采用Golbenkey Clustail及Blast程序软件进行序列比较。
