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Taq DNA聚合酶文献资料
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2种制备Taq DNA聚合酶方法的比较
目的 比较2种制备纯化Taq DNA聚合酶的方法,为PCR提供实验用酶.方法 Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli菌株,IPTG诱导12 h后收集菌体,分别用硫酸铵沉淀法和冻融法进行纯化,SDS-PAGE电泳和PCR扩增分析比较其纯度和活性.结果 硫酸铵沉淀法制备的Taq DNA聚合酶活性能可有效扩增DNA 片段;冻融法制备的Taq DNA聚合酶活性较低.结论 硫酸铵沉淀法制备的Taq DNA聚合酶优于冻融法,能够达到分子生物学实验中基因扩增的要求.
关键词： Taq DNA聚合酶 表达 纯化 -
基因重组Taq DNA聚合酶的制备
目的 制备重组Taq DNA聚合酶,为PCR提供试剂.方法 用Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli菌株,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导12 h表达Taq DNA聚合酶,溶菌酶、NP40裂解细菌,硫酸铵沉淀、4 ℃透析,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和PCR扩增分析其纯度和活性.结果 分离纯化制备的Taq酶,纯度、活性都可与同类产品相比,能有效扩增DNA 片段.结论 该方法制备可用于PCR的Taq酶具有快速简便的优点.
关键词： Taq DNA聚合酶 基因工程 分离纯化
