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小鼠异位气管移植慢性排斥反应中PD-1+CD8+Tregs的研究
目的 建立小鼠异位气管移植慢性排斥反应的模型,检测术后第28天移植物中PD-1+CD8+Tregs的表达水平,并探讨其作用机制.方法 将60只体质量相同的小鼠随机分为3组,每组受体、供体各10只,实验组、干预组采用BALB/C小鼠为供体,C57BL/6小鼠为受体;对照组供体、受体均使用C57BL/6小鼠,干预组加用环孢素.将供体小鼠气管移植到受体背部皮下,术后第28天取出,采用苏木精-伊红染色法(HE)、免疫组化法及双重免疫荧光法检测PD-1+CD8+Tregs的表达情况.结果 受体小鼠全部存活,手术成功率为100％.实验组移植物上皮细胞完全坏死脱落,可见明显纤维化组织,上皮覆盖率为0％,管腔堵塞率约为100％,PD-1表达强阳性,CD8+表达强阳性;对照组小鼠移植物组织结构接近正常,上皮覆盖率约为90％,纤维化不明显,管腔堵塞率约为0％,PD-1弱阳性染色,CD8+弱阳性染色;干预组结果介于两者之间.实验组PD-1+CD8+Tregs阳性率较其他两组高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 本研究成功建立小鼠异位气管移植慢性排斥反应模型,PD-1+CD8+Tregs在该慢性排斥反应中可能存在负反馈调节机制.
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小鼠同种气管异位移植建立闭塞性细支气管炎动物模型
目的 闭塞性细支气管炎(OB)是临床肺移植后主要致死因素且发病机制不清,拟用小鼠气管异位移植模拟OB的病变过程,为研究OB提供动物模型.方法 将小鼠分成同基因移植对照组(BALB/C→BALB/C)与异基因移植实验组(BALB/C→C57BL/6)两大组,供体小鼠气管移植到受体小鼠背部两侧皮下,术后3、7、14、21、28 d取出气管移植物,苏木精-伊红染色观察比较组织形态改变,统计分析其上皮覆盖率和管腔闭塞率.结果 共完成70例小鼠气管同种异位移植手术,手术成功率94.3%.不同取材时间,同基因对照组和异基因实验组气管移植物苏木精-伊红染色有不同改变,其中以术后21 d实验组气管移植物OB改变为典型,而对照组气管移植物组织结构基本正常,此时上皮覆盖率两组分别为:0%和(92±6)%,管腔闭塞率两组分别为:(73±12)%和<3%,差异均有显著性意义.结论 小鼠气管异位移植成功模拟肺移植后OB的病变过程,术后21 d可作为研究OB的重要时间点.手术操作简便,成功率高,技术稳定.适用于临床肺移植术后OB的发病机制和治疗学的研究.
