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阳春砂愈伤组织文献资料
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农杆菌介导的抗菌肽基因转化阳春砂愈伤组织的研究
目的 确定遗传转化条件,将抗菌肽CN基因转入阳春砂愈伤组织.方法 以阳春砂愈伤组织为受体材料,以农杆菌EHA105/pCAMBlA1305.2 - CN工程细胞介导抗菌肽CN基因转化阳春砂,设计正交实验,通过分析gus报告基因的瞬时表达比较转化影响因素,并对目的基因CN进行PCR检测.结果 农杆菌浓度、侵染时间、共培养温度、共培养时间及乙酰丁香酮浓度对转化率的影响有显著差异性.阳春砂愈伤组织遗传转化的佳条件组合是:农杆菌浓度为OD600=0.5,侵染时间10 min,共培养温度24℃,共培养时间4d,共培养培养基添加乙酰丁香酮200 μmol·L-.gus基因瞬时表达呈阳性的愈伤组织DNA经目的基因CN的PCR检测可见清晰的目的条带.结论 建立了农杆菌介导的阳春砂愈伤组织的转化条件,目的基因CN已转入阳春砂愈伤组织.
