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  • 中药血清对大鼠bMSCs体外成软骨分化中Col2a1和Acan表达的影响

    作者:钱晓伟;潘丹岷;谭湘陵;张爱国;蔡建平

    目的 观察中药雪莲花、丹参、仙灵脾、黄芪和复方右归饮含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Ⅱ型胶原α1 (Col2a1)和软骨聚糖蛋白(Acan)表达的影响.方法 2月龄SD大鼠分离骨髓间充质干细胞,置含15%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基中培养.传至第3代后,将培养细胞分为未诱导组、TGF诱导组、中药血清诱导组和TGF -中药血清联合诱导组.中药血清的使用浓度为5%,由上述中药连续大鼠灌胃3d后,分离外周血获得.各组细胞诱导至7d和14 d时,分别提取总RNA,逆转录成cDNA,荧光定量PCR法检测Col2a1和Acan的表达,同时应用细胞免疫化学法检测诱导14 d的Ⅱ型胶原的表达.结果 bMSCs在TGF -β1的诱导下可以分化为软骨样细胞,在诱导后7d和14 d,TGF诱导组Col2a1的表达量显著高于未诱导组,分别为14.272倍和35.833倍,中药血清组Col2a1的表达量变化不显著,TGF -中药血清联合诱导组Col2a1的表达量虽高于未诱导组,但显著低于TGF诱导组.Acan基因的表达量在各组中均显著低于未诱导组.结论 骨髓间充质干细胞在体外可以分化为软骨样细胞,中药对细胞成软骨分化没有明显的促进作用,并对TGF诱导效应具有一定的抑制作用.

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