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六味地黄颗粒对哮喘大鼠转化生长因子-βⅠ、Ⅱ型受体影响的研究
目的 探讨六味地黄颗粒对哮喘大鼠肺部TGF-βR Ⅰ、TGF-βRⅡmRNA含量的干预作用;方法 逆转录-荧光实时定量PCR法检测大鼠肺组织TGF-βR Ⅰ、TGF-βRⅡmRNA含量,比较正常组、哮喘模型组、各用药组之间两个指标水平的差异;结果 联合用药组的大鼠肺组织TGF-βR Ⅰ、TGF-βRⅡmRNA接近,均接近于于正常组,且显著低于模型组;结论 六味地黄颗粒能够协同激素类药物,下调哮喘大鼠肺组织TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡmRNA的表达.
关键词: 六味地黄颗粒 哮喘 转化生长因子-βⅠ型受体 转化生长因子-βⅡ型受体 -
USP4通过去泛素化转化生长因子-βⅠ型受体调控乳腺癌细胞的生物学活性
目的 观察泛素特异性蛋白酶USP4对转化生长因子-βⅠ型受体(TGFβRI)的去泛素化调节及其对乳腺癌细胞生物学活性的调控.方法 通过慢病毒感染构建过表达USP4的稳定乳腺癌细胞株BT-549.在乳腺癌细胞中表达外源性泛素,通过泛素化实验验证USP4对TGFβRI的泛素化修饰.采用克隆形成实验和划痕实验检测USP4对乳腺癌细胞克隆形成能力、迁移能力的影响.结果 过表达USP4的稳定乳腺癌细胞株中USP4 mRNA的表达量(△Ct=3.43 ±0.05)是空白对照细胞(△Ct =7.26 ±0.03)的14.22倍,差异有统计学意义(t=69.350,P=0.000);USP4蛋白的表达量是空白对照细胞的4.99倍,差异有统计学意义(t=28.440,P=0.000).过表达USP4后TGFβRI的体外泛素化水平明显降低.在克隆形成实验中,稳定过表达USP4、病毒对照及空白对照的BT-549细胞克隆形成率分别为(25.83±1.01)%、(11.83±0.60)%、(7.17±0.60)%,分别t=11.880、15.840,差异有统计学意义(P =0.000).在划痕试验中,放大200倍视野下观察稳定过表达USP4、病毒对照及空白对照的BT-549细胞,每个视野可见发生迁移的细胞个数为(56.67±1.76)、(27.00±1.16)、(27.33±1.45)个,t=14.070、12.840,差异有统计学意义(P=0.000).结论 USP4可通过其去泛素化酶的活性解除TGFβRI耦联的泛素链稳定TGFβRI的表达,从而增强乳腺癌细胞的生物学活性.
关键词: 乳腺癌 泛素特异性蛋白酶USP4 转化生长因子-βⅠ型受体 泛素化