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  • phoA为报告基因的甲型副伤寒沙门氏菌启动子文库的建立及初步鉴定

    作者:许泽仰;洪愉;冯梦蝶;毛普加;宋武战;杨洪文;赵继华;黄芬;井申荣;曾韦锟

    目的:构建以phoA为报告基因的甲型副伤寒沙门氏菌启动子文库。方法构建了以phoA为报告基因的“启动子陷阱载体” pPhoA,将甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA的随机酶切片段(500~1500 bp)连接到载体上,启动phoA表达产物与BCIP产生蓝色反应筛选启动子,经过PCR、测序、比对等分析文库质量。结果库容量达到30000个,覆盖基因组全长的2.6倍,同时验证了4个能够在加入BCIP的平板中表现出蓝色的菌落,发现了4个启动子插入片段。结论成功构建高质量的甲型副伤寒沙门氏菌启动子文库,为进一步研究甲型副伤寒沙门氏菌的基因表达与调控奠定了基础。

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