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山羊β-乳球蛋白启动子(BLG)文献资料
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人血小板生成素基因乳腺特异表达载体的构建和表达
目的 为了获得能在转基因动物乳汁中高效表达人血小板生成素(TPO)的特异表达载体.方法 将山羊β-乳球蛋白基因5'端上游-3.9 kb和-1.9 kb调控序列及β-酪蛋白启动子分别与人TPO基因连接,构建了pB3.9T、pB1.9T和pPT3个乳腺特异表达载体.将上述载体分别进行瞬间转染和稳定整合筛选实验,从mRNA及蛋白水平检测TPO基因的表达.结果 BLG3.9、BLG1.9和P1A3 3种调控元件都可以启动人TPO在乳腺细胞中特异表达.瞬时转染时3种载体表达水平依次为pPT＞pB3.9T＞pB1.9T.但当外源基因稳定整合入细胞基因组后,TPO表达量持续升高,且pB3.9T表达量明显超过另外两种载体.结论 证实了BLG转录子去阻遏和激活转变调节的存在,可能在其5'端-3.9 kb与-1.9 kb之间存在这一调节区域.并且与BLG1.9相比,BLG3.9能更有效地启动人TPO基因在乳腺细胞中的表达,也说明在-3.9至-1.9 kb之间可能存在特殊的增强序列.
