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聚合酶Ⅰ和转录物释放因子在非小细胞肺癌中表达水平和对迁移侵袭的影响
目的 探讨聚合酶Ⅰ和转录物释放因子(PTRF)在非小细胞肺癌中的功能.方法 使用干扰RNA质粒构建的方法构建2条短发卡RNA(shRNA)s和1条对照shRNA,构建成功后进行空白组、对照组、2组实验组(A组、B组)的转染,使用反转录-聚合酶链反应(RT-RCR)进行目的PTRF的基因水平检测,同时使用蛋白印迹的方法(Western blot)进行蛋白表达水平的检测.然后对A549细胞株进行划痕实验和细胞侵袭实验(Transwells),比较沉默PTRF后对细胞株迁移和侵袭的能力的影响.结果 癌旁组织的PTRF的mRNA和蛋白表达明显高于癌组织,差异有统计学有意义(P=0.003、0.016).shRNA-A组和shRNA-B组PTRF的mRNA相对表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P =0.009、0.012).shRNA-A组和shRNA-B组PTRF蛋白的相对表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P =0.002、0.005).转染A549后,使用划痕实验和Transwell侵袭实验进行比较,shRNA-A组和shRNA-B组的细胞迁移和侵袭能力均出现明显的增强,差异有统计学意义(P =0.018、0.029和P=0.024、0.038).结论 非小细胞肺癌通过抑制PTRF的表达促进迁移侵袭.
关键词: 聚合酶Ⅰ和转录物释放因子 非小细胞肺癌 迁移 干扰RNA