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细胞核表皮生长因子受体文献资料
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重组慢病毒介导RNA干扰抑制DNA依赖蛋白激酶催化亚基表达对肺癌细胞中C225诱导表皮生长因子受体核转位及敏感性的影响
目的 构建人DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)基因RNA干扰慢病毒载体,观察在非小细胞肺癌细胞株中沉默DNA-PKcs对C225诱导的表皮生长因子受体(EGFR)核转位及C225抑制细胞增殖的影响.方法 构建慢病毒干扰载体(LV-si-DNA-PKcs)感染A549细胞.荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测DNA-PKcs mRNA表达;Western blot检测DNA-PKcs和细胞核EGFR蛋白的表达.细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测C225对细胞的增殖抑制作用.结果 LV-si-DNA-PKcs感染的A549细胞见绿色荧光,感染率达95％以上;LV-si-DNA-PKcs有效干扰DNA-PKcs蛋白及mRNA表达水平(P＜0.05).加C225前未见细胞核EGFR表达.C225处理1h,LV-si-DNA-PKcs细胞株见细胞核EGFR表达,持续用药4、24 h细胞核EGFR表达无明显增加;在LV-si-control细胞株及空白组,C225处理1、4、24h后细胞核EGFR表达逐渐增多.C225处理48 h后,LV-si-DNA-PKcs细胞株的细胞存活率开始低于其他2组细胞,72 h细胞存活率明显降低[(40.04±2.89)％比(55.82±7.11)％、(52.67±1.43)％,F=9.392,P＜0.01].结论 抑制A549细胞中DNA-PKcs表达,在一定程度上抑制了C225诱导的EGFR细胞核转位,增强C225对细胞的增殖抑制作用.
