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大鼠骨髓基质细胞与胶原-壳聚糖复合后修复牙槽骨缺损的研究
目的 研究大鼠骨髓基质细胞与胶原-壳聚糖复合后对牙槽骨缺损的修复效果.方法 建立牙槽骨缺损的大鼠模型24只,将其随机分为实验组和对照组,各12只.对比两组大鼠骨缺损修复情况.结果 复合物植入4周时,实验组已有成骨细胞生成,可见少量骨基质,对照组仅有骨细胞生成,显著差异;复合物植入8周时,实验组复合物与新生成的骨质交杂在一起,胶原-壳聚糖开始降解,对照组成骨细胞与骨基质开始增殖,可见少量新骨生成,两组骨生长差异明显;复合物植入12周时,两组胶原-壳聚糖微不可见,新生骨质与天然骨相融,打破二者界限,且新生骨质已较成熟,两组新骨生长情况无明显差异.结论 在牙槽骨缺损修复中,诱导后的大鼠骨髓基质细胞与胶原-壳聚糖复合物的应用价值更高.
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生物合成与细胞凋亡在胶原-壳聚糖真皮支架修复创面中的作用和机制
目的 探讨胶原一壳聚糖真皮支架在修复全层皮肤缺损的生物合成和细胞凋亡机制,并明确支架植入修复创面与无支架植入的瘢痕修复创面的区别.方法 将胶原-壳聚糖,硅橡胶双层人工真皮支架移植于猪全层皮肤缺损创面,对植入后1、2、3周及植入支架2周加植表皮后2周的创面和修复情况进行观察.同时,通过免疫组织化学、末端脱氧核苷酸介导的生物素化的脱氧尿嘧啶DNA切口末端标记、天狼猩红染色方法,对不同时间的创面的TGF-β1.的表达、细胞凋亡发生情况以及支架自身胶原替代进行检测和观察.以不植入支架的创面为对照.结果 ①实验组创面与正常肉芽组织不同.②TGF-β1在实验组表达高峰在支架植入后1、2周,3-4周持续下降;在对照组中,1～3周的创面持续升高,4周下降.组问比较,1、2周实验组明显高于相应对照组,3、4周实验组明显低于相应对照组.③实验组植入支架后2-4周,细胞凋亡持续增多;对照组3-4周创面细胞凋亡持续增多.组间比较,l周两者差异无统计学意义,2-4周实验组显著高于相应对照组.④天狼猩红染色观察:实验组1周,自身胶原已开始合成,2-3周基本完成支架自身胶原替代.结论 胶原-壳聚糖真皮支架在伤口愈合中有明显作用,其修复创面的机制与自然的肉芽或瘢痕修复不同.
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组织工程支架-复合细胞载体的研制
目的:研制出符合组织工程要求的载体.方法:根据细胞的生长特点,研制了一种胶原-壳聚糖复合载体,并对该载体进行了系统的生物相容性研究和细胞培养的应用研究.结果:显示这种复合载体具有良好的生物相容性,对人体无毒性,对细胞有一定的亲和作用,并适合细胞的三维生长,起到良好的支架作用.是一种符合组织工程要求的复合细胞载体.
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胶原-壳聚糖和角膜基质细胞复合膜的构建及其生物相容性
目的:探讨以胶原-壳聚糖为生物支架构建角膜基质细胞复合膜及其生物相容性.方法:兔和人角膜基质细胞分离培养后种植到胶原-壳聚糖共混膜上,构建成复合膜后移植到异体大耳白兔角膜基质囊袋中,术后1、2和4周时分别于活体进行前节OCT、Cs-4检查和离体组织学及免疫组化检测,观察复合膜中角膜基质细胞生长状态、生物支架对正常角膜细胞的影响及生物膜的降解情况.结果:活体前节OCT、Cs-4检查和离体组织学及免疫组化观察结果显示,兔和人角膜基质细胞在胶原-壳聚糖共混膜上生长良好,移植后复合膜逐渐发生降解,角膜组织未发生坏死和溶解,角膜上皮、基质和内皮细胞形态结构正常.结论:胶原-壳聚糖可作为角膜基质构建的生物支架,角膜共焦显微镜及前节OCT作为新的手段可活体观察构建后的角膜基质生物学活性.
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胶原-壳聚糖/bFGF培养人成纤维细胞生物特性研究
目的:研究一种适于人成纤维细胞生长的组织工程支架材料,确定碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的用量.材料与方法:采用胶原与壳聚糖整合bFGF做为人成纤维细胞生长的支架材料,用体外细胞培养法确定胶原与壳聚糖在材料中的配比,用体外细胞相容性直观法观察材料与人成纤维细胞的相容性.结果:选择出了胶原与壳聚糖在材料中较佳的配比,确定了bFGF在材料中的用量范围,人成纤维细胞在胶原-壳聚糖/bFGF膜持续生长繁殖,具有生物降解性.材料与细胞呈低毒性反应.结论:胶原-壳聚糖/bFGF可做为组织工程的支架材料.
