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HPLC-DAD波长切换法同时测定化扁汤中10种有效成分的含量
目的:采用高效液相色谱-二极管阵列检测(H PLC-DAD)波长切换法建立同时测定化扁汤中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、黄芩苷、连翘苷和牛蒡苷10种有效成分的定量分析方法.方法:采用SHIMADZU Insertsustain C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以流动相乙腈-0.2％磷酸溶液梯度洗脱,DAD检测器,检测波长为327nm(0～37min,检测新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C)、278nm(37～41.3 min,检测黄芩苷)、228 nm(41.3～50 min,检测连翘苷和牛蒡苷),流速1.0 mL·min-,柱温为35℃.结果:各成分均能有效检出且分离度良好;新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、黄芩苷、连翘苷、牛蒡苷10种成分的进样浓度分别在4.512～1.444×102 μg·mL-1(r=0.999 9)、14.162～4.532×102 μg·mL-1(r=1.0000)、2.538～0.812×102 μg·mL-1(r=0.999 9)、3.275～1.048×102 μg·mL-1 (r=0.999 9)、2.638～0.844×102 μg·mL-1 (r=0.999 9)、5.912～1.892×102 μg·mL-1(r=0.999 9)、8.162～2.612×102 μg·mL 1(r=0.999 9)、30.288～9.692×102 μg·mL-1(r=0.999 9)、3.288～1.052×102 μg·mL-1(r=0.999 9)、5.812～1.860×102 μg·mL-1 (r=0.999 9)与峰面积呈良好的线性关系;加样回收率(n=6)分别为99.1％(RSD=1.1％)、99.6％ (RSD=0.9％)、100.2％ (RSD=1.5％)、99.8％(RSD=1.6％)、99.5％ (RSD=1.4％)、100.3％ (RSD=1.0％)、100.0％ (RSD=2.0％)、99.7％ (RSD=1.5％)、99.6％(RSD=1.5％)、99.7％(RSD=1.9％).结论:利用HPLC-DAD波长切换法可同时测定化扁汤中10种有效成分的含量,该法简便可靠,重现性好,为化扁汤的质量控制与评价提供科学依据.
