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柱后修饰文献资料
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高效液相色谱柱后修饰荧光检测法测定大鼠血浆中氢溴酸加兰他敏的浓度
目的:建立HPLC柱后修饰荧光检测法测定大鼠血浆中氢溴酸加兰他敏的方法.方法:血浆样本经甲醇直接沉淀蛋白后采用柱后修饰荧光检测法测定.色谱柱为Hypersil ODS2柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm)；流动相为0.1％三乙胺溶液-甲醇(60∶40),柱温30℃；流速0.8mL·min-1,进样量20μL；荧光检测的激发波长和发射波长分别为290nm和320 nm.柱后修饰采用25 mmol·L-1磷酸二氢钠缓冲溶液(磷酸调节溶液pH值至3.8；流速0.2mL·min-1.结果:氢溴酸加兰他敏在3.23～828.13 ng·mL-1内线性关系良好(r=0.9998),低定量限为3.23ng·mL-1.提取回收率为84.32％～95.24％,日内精密度为2.67％～5.46％.日间精密度为3.10％～7.48％.结论:柱后修饰较大提高了氢溴酸加兰他敏检测灵敏度,该方法简便、准确、所需血浆量少,为临床进一步研究氢溴酸加兰他敏提供了基础.
