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新型纳米载体SuperfectTM适转染条件的研究
目的:对新型纳米转染载体SuperfectTM的转染效率和细胞毒性进行初步研究,以探讨其适的转染条件.方法:以50%融汇率的小鼠黑色素瘤细胞为靶细胞,在不同条件下将,报告基因质粒pEGFP-C1与载体SuperfectTM混合为复合物进行转染.各实验组:不同的质粒剂量(0.25 μg,0.50 μg)、不同的N/P(N:载体分子表面胺基的数量,P:DNA中磷酸基团的数量)比(2:1,5:1,10:1)及复合物与细胞的孵育时间(3 h,6 h).各对照组:裸质粒转染组、载体转染组,非转染组为对照.转染72 h后,流式细胞仪检测转染效率,MTT法检测细胞毒性. 结果:在不同条件下,SuperfectTM的转染效率有显著性差异(P<0.05),其细胞毒性与载体剂量和孵育时间相关.当质粒剂量为0.5 μg,N/P比为5:1,复合物与细胞孵育3 h时,SuperfectTM不仅具有较高的转染效率,而且表现出较低的细胞毒性.结论:SuperfectTM是一种高效低毒的转染载体,其适转染条件主要与N/P比及复合物与细胞的孵育时间相关.SuperfectTM在基因治疗领域将具有良好的应用前景.
关键词: SuperfectTM 转染 pEGFP-C1 -
新型转染试剂SuperfectTM转染效率的初步研究
SuperfectTM是一种新型的纳米转染载体,该实验以小鼠黑色素瘤细胞为靶细胞,以pEGFP-C1为导入基因,探讨了其转染效率和细胞毒性.结果显示,当质粒剂量为0.5ug,载体与质粒用量比为5:1,两者形成的复合物与细胞孵育3h时,SuperfectTM具有较高的转染效率,且细胞毒性较低.高效低毒的SuperfectTM在基因治疗领域将具有良好的应用前景.
关键词: SuperfectTM 转染 pEGFP-C1