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乏氧诱导因子lα文献资料
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辐射诱导乏氧HeLa细胞HIE-Lα和DNA-PK相互调控机制的研究
目的 初步探讨辐射效应诱导下乏氧人宫颈癌细胞系HeLa细胞乏氧诱导因子-lα(HIF-lα)和DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)表达相关性及其调控机制.方法 免疫印迹法检测乏氧状态下HeLa细胞接受射线照射后HIF-lα和DNA-PK(包括DNA-PKcs及Ku80)表达情况;运用靶向抑制HIF-lα或DNA-PKcs的小发卡样干扰RNA(shRNA)表达质粒分别转染乏氧HeLa细胞,经辐射诱导后检测不同时间点各自DNA-PKcs或HIF-lα表达的变化.结果 乏氧HeLa细胞经辐射诱导后0、12、24、48 h时间点检测到HIF-lα、DNA-PKcs和Ku80表达随时间增加逐渐增高,其中HIF-lα和DNA-PKcs的相对表达量呈正相关(r=0.816,P=0.041);运用HIF-lα-shRNA表达质粒明显抑制乏氧HeLa细胞内HIF-lα表达,检测到细胞经照射后12、24、48 h时间点DNA-PKcs的表达与转染空白质粒的阴性对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05);而pDNA-PKcs-shRNA表达质粒抑制DNA-PKes表达后检测各时间点HIF-lα的表达与转染空白质粒的阴性对照组相比均明显减少(P<0.05).结论 辐射诱导乏氧HeLa细胞内HIF-lα表达与DNA-PKcs的表达水平相关;通过抑制DNA-PKcs的表达能显著降低乏氧HeLa细胞HIF-lα表达水平,对HIF-lα的调控机制提出新的思路.
