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Nar1文献资料
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Nar1基因酵母表达载体的构建及表达鉴定
目的:构建Nar1基因的酵母表达载体,并纯化His-Nar1融合蛋白,为进一步研究Nar1的相互作用蛋白及其功能奠定基础.方法:通过PCR扩增Nar1全长基因;通过定向克隆的方法将Nar1片段与载体pYES2/NTC连接;通过乙酸锂转化法把重组质粒转化入野生型酵母菌株INVSc1;再通过免疫沉淀的方法纯化His-Nar1融合蛋白;通过Western blot检测靶蛋白.结果:DNA测序验证穿梭表达质粒pYES2/NTC-Narl构建成功,Western blot检测到融合蛋白His-Nar1的表达.结论:成功构建Nar1酵母过表达载体,并且可以有效表达融合蛋白His-Nar1.
