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  • 结核杆菌Edman株Ag85C基因的克隆表达与鉴定

    作者:谢良伊;周洲

    目的 克隆人结核杆菌Ag85c基因并在大肠杆菌中表达,研究其对结核病预防和治疗过程中的免疫保护作用. 方法 设计一对特异性引物,PCR扩增人结核杆菌Edman株ag85c基因开放阅读框并定向克隆到原核表达载体pQE30,通过酶切、PCR和测序鉴定重组质粒,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组蛋白. 结果 构建了pQE30-Ag85C重组质粒;在大肠杆菌中表达了一分子量约30 kDa的重组蛋白. 结论 重组质粒pQE30-Ag85C构建成功并在大肠杆菌中高效表达,为Ag85C保护性抗原位点分析和新型疫苗的研制奠定了基础.

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