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miR-423-5p在卵巢癌组织中的表达及对癌细胞增殖的影响
[目的]探讨miR-423-5p在卵巢癌组织中的表达及对卵巢癌细胞增殖的影响.[方法]收集25例卵巢癌及相应癌旁正常组织标本,荧光定量PCR检测两种标本中miR-423-5p的表达.采用荧光定量PCR检测4株卵巢癌细胞(SK-OV-3、A2780、COC1、OVCAR3)中miR-423-5p的表达,选择miR-423-5p表达较低的细胞株转染miR-423-5p mimic及NC mimic,选择miR-423-5p表达较高的细胞株转染miR-423-5p inhibitor及NC inhibi-tor.MTT检测细胞的增殖情况;荧光定量PCR检测两株卵巢癌细胞中生长抑制基因4(ING-4)的表达;采用双荧光素酶实验检测miR-423-5p对ING-4的调控作用.[结果]荧光定量PCR结果显示:卵巢癌组织中miR-423-5p的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05).miR-423-5p在A2780细胞中表达低,OVCAR3细胞中表达高;在A2780细胞中,与NC mimic转染组相比,miR-423-5p mimic组细胞增殖能力显著升高,ING-4的表达显著降低(P<0.05);在OVCA3细胞中,与转染NC inhibitor相比,转染miR-423-5p inhibitor显著抑制细胞增殖并促进ING-4的表达.双荧光素酶结果显示:与wt-ING-4 3'UTR+ NC mimic组相比,wt-ING-4 3'UTR+ miR-423-5p mimic组细胞的相对荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而mut-ING-4 3'UTR+NC mimic组和mut-ING-4 3'UTR+ miR-423-5p mimic组相对荧光素酶的活性均未发生显著变化.[结论]miR-423-5p与卵巢癌的发生发展密切相关,miR-423-5p可作为预防和治疗卵巢癌的新靶点.
关键词: 卵巢肿瘤/病理生理学 微RNAs 细胞增殖 -
2-甲氧基雌二醇诱导卵巢癌细胞凋亡的研究
目的 探讨2-甲氧基雌二醇(2-ME)诱导卵巢癌细胞系OVCAR-3细胞和卵巢癌原代培养细胞凋亡的作用及其机制.方法 以2-ME作用于卵巢癌OVCAR-3细胞和原代培养细胞,采用MTT法检测细胞存活率、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,JC-1染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位(△Ψm),比色测定试剂盒检测caspase-3和caspase-8活性.结果 与对照组相比,OVCAR-3细胞2-ME组存活率显著下降(100%vs 70.5%),凋亡率明显增加(5.3%vs 40.5%):卵巢癌原代培养细胞2-ME组存活率显著下降(100%vs 61.8%),凋亡率明显增加(5.4%vs36.9%);此外,2-ME明显降低卵巢癌OVCAR-3细胞和原代培养细胞的△Ψm,提高caspase-3和caspase-8活性.而预先以Z-VAD阻断caspase能逆转2-ME的效应.结论 2-ME通过凋亡信号通路的内源性和外源性途径,诱导卵巢癌细胞凋亡.
关键词: 雌二醇/药理学 卵巢肿瘤/病理生理学 细胞凋亡/药物作用