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加减枳实薤白桂枝汤通过AC/cAMP通路对缺血再灌注大鼠心肌组织水通道蛋白表达的影响
目的 探讨加减枳实薤白桂枝汤(枳实、薤白、三七、人参等)对缺血再灌注大鼠心肌组织水通道蛋白(AQP)表达的影响及其可能的作用机制.方法 将52只SD大鼠随机分为4组:假手术组(n=10)、模型组(n=14)、枳实薤白桂枝汤组(n=14)、加减枳实薤白桂枝汤组(n=14).大鼠灌胃给药14天后结扎心脏左冠状动脉前降支,按缺血30 min再灌注120 min的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型.全自动生化分析仪检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)变化;HE染色观察心脏组织病理形态学变化;酶联免疫吸附法检测血浆腺苷酸环化酶(AC)、环磷酸腺苷(cAMP)水平;免疫组织化学染色检测心肌组织AQP1、AQP4的定位表达;实时荧光定量PCR检测心肌组织AQP1、AQP4 mRNA表达;Western blot检测心肌组织蛋白激酶A(PKA)、磷酸化PKA(P-PKA)、cAMP反应原件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB (P-CREB)及AQP1、AQP4的蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组血清LDH、cTnⅠ及血浆AC、cAMP含量升高(P＜0.01),心肌组织P-PKA、P-CREB和AQP1、AQP4 mRNA及蛋白表达升高(P＜0.01);与模型组比较,枳实薤白桂枝汤组、加减枳实薤白桂枝汤组血清LDH、cTnⅠ及血浆AC、cAMP含量降低(P＜0.01),心肌组织P-PKA、AQP1、AQP4 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.01);与枳实薤白桂枝汤组比较,加减枳实薤白桂枝汤组血清LDH、cTnⅠ及血浆AC、cAMP含量降低(P＜0.01),心肌组织P-PKA、AQP1、AQP4 mRNA及蛋白表达降低(P＜O.01).结论 加减枳实薤白桂枝汤可以改善缺血再灌注后心肌细胞病理损伤,其作用机制可能与下调AC/cAMP通路,进而抑制AQP1、AQP4 mRNA及蛋白表达有关.
