您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
核苷载体/药理学文献资料
-
胰腺癌细胞膜平衡型核苷转运载体和集中型核苷转运载体的检测
目的:检测胰腺癌细胞膜上Na+非依赖的平衡型核苷转运载体(ENT)和Na+依赖性的集中型核苷转运载体(CNT),并对ENT进行定量检测.方法:将胰腺癌细胞株(Panc-1)在含潘生丁(100 μmol/L)的培养基中分别温育8,15,60,120 min,收集细胞用乙腈裂解,荧光分光光度计测定细胞悬液中潘生丁的荧光强度,依据平行悬液中的细胞数量计算出单个细胞表面ENT的数量;再将Panc-1分别在含5-氟尿嘧啶(5-FU)和5-FU+潘生丁两种培养基中分别温育15,30,60,120,240 min,毛细管区带电泳法测定5-FU含量;根据平行悬液中的细胞数量和单细胞体积计算单细胞中5-FU的浓度,间接判定细胞膜上是否存在CNT载体.结果:Panc-1在含潘生丁的培养基温育8 min后即能检测到细胞的荧光强度,15 min达高峰20.2×10-19 mol;借助潘生丁测得单个细胞表面有1.25×105个ENT.用潘生丁阻断ENT后,5-FU仍可被转运入胰腺癌细胞中,且细胞内的5-FU高浓度达到(138.3±9.77) mg/L,明显高于培养基中5-FU的浓度(P=0.011).结论:与潘生丁结合后,通过荧光法可以定量检测细胞表面的ENT;通过阻断ENT并测定细胞中5-FU浓度,可以判断胰腺癌细胞膜上存在CNT,从而对合理应用化疗药物,提高化疗效果提供依据.
