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脑微血管内皮细胞株文献资料
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永生化小鼠Bend.3细胞株具有脑微血管内皮细胞的屏障特性
目的 评价永生化小鼠脑微血管内皮细胞株Bend.3是否具有脑微血管内皮细胞的屏障特性.方法 将小鼠脑微血管内皮细胞株Bend.3接种于细胞培养插内,跨内皮细胞电阻抗(transendothelial electrical resist-ance,TEER)和辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)通透性实验检测其屏障功能.Western blot法和直接荧光染色法观察其紧密连接相关蛋白Occludin、ZO-1的表达及细胞骨架蛋白F-actin的分布.结果 Bend.3细胞的TEER随培养时间延长逐渐升高,10 d达82.3±6.0 Ω·cm2,与培养3 d时的37.3±3.1 Ω·cm2相比,差异有统计学意义(P<0.05).其培养10 d和3 d的平均HRP通透率在120 min分别为(2.2 4-0.05)%和(4.3 4-0.20)%,差异有统计学意义(P<0.05).培养10 d时该细胞表达高浓度的紧密连接蛋白Occludin、ZO-1,且F-aetin主要分布在细胞周边,线条完整连续,未见明显缝隙形成.结论 小鼠脑微血管内皮细胞株Bend.3具有脑微血管内皮细胞的屏障特性,且其屏障功能在接种10 d后可达到理想的状态.
