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锌-金硫蛋白文献资料
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家兔肝脏中锌-金硫蛋白提取工艺的研究
目的研究硫酸锌诱导的家兔肝脏锌-金属硫蛋白(Zn-MT)的提取工艺.方法选用正交试验法对硫酸锌诱导的兔肝锌-金属硫蛋白的提取工艺进行优选,以原子吸收法测得锌提取量和紫外分光光度法测得巯基活性及杂蛋白浓度为评价指标,选用L9(34)正交表进行正交实验.考察影响提取锌-金属硫蛋白的4个因素分别为:pH8.6的Tris-HCl缓冲溶液和乙醇-氯仿(1.03∶0.08)溶液作为提取剂的用量、80℃水浴变性时间、超声强度及时间.并且对提取液用Sephadex G-50凝胶柱色谱法分离纯化了Zn-MT,考察提取工艺对其分离纯化效果的影响.结果佳方案为:每克兔肝用3mL缓冲溶液和2mL乙醇-氯仿溶液,80℃水浴变性6min,中等超声强度提取20min.凝胶柱色谱法纯化得到Zn-MT粗品产率约为2.5mg/g肝,而提取工艺中杂蛋白溶出量可影响Zn-MT的分离纯化效果.结论为常规实验室制备Zn-MT提供了简便可靠的方法.
